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  • ExactBlot?非輕重鏈特異性二抗

    2023-11-24
    正能生物·市場部
    瀏覽次數: 446


    ExactBlot? Secondary Antibody for IP

    ''?'',安然無憂!

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    IP(免疫沉淀)實驗是一種常用的生物化學實驗技術,用于檢測和分離特定的蛋白質。它基于抗體的高度特異性,可以用來富集某個特定的蛋白質,并去除其他非特異性的蛋白質。
    免疫沉淀的簡要步驟為:1)將抗體與固相支持物相互作用。2)抗體與待測樣品中的目標蛋白質結合,形成抗原-抗體復合物。3)通過洗滌步驟去除非特異性的蛋白質。4)將特異性蛋白質從固相支持物上解離下來,完成富集。5)通過多種方法對富集后的蛋白質進行分析。
    免疫沉淀實驗是研究蛋白質相互作用、信號傳導以及調控蛋白功能的重要工具之一,廣泛應用于生物醫學研究中。

    ExactBlot?非輕重鏈特異性二抗

    IP實驗原理


    IP中的輕重鏈干擾

    當進行IP實驗時,IP抗體在洗脫后加入loading buffer的變性過程中被破壞了結構,斷裂為組成抗體的輕重鏈。此時若IP抗體種屬與WB抗體種屬來源相同,變性后的抗體就會被常規Anti-IgG(H+L)二抗識別,顯影時就出現了IP抗體變性后產生的輕重鏈。其中輕鏈大小為25kDa左右,重鏈大小為55kDa左右,當目標蛋白分子大小在輕重鏈附近時,這類信號可能會影響我們對實驗結果的判斷。

    避免輕重鏈雜信號的常見方法有:
    1)捕獲抗體、檢測抗體采用不同來源物種,使用針對檢測抗體物種的特異性二抗;
    2)捕獲抗體采用沒有恒定區的納米抗體。
    但是受限于實驗經費和各種外部因素,這兩種方法有時并不是這么容易實現。


    正能ExactBlot? IP專用二抗

    為了幫助客戶避免在免疫沉淀實驗中出現的輕重鏈干擾問題,正能生物開發了專用于IP實驗的優化二抗,優化后的二抗具有空間特異性,能夠識別空間構象表位,只與非變性的WB檢測一抗相互結合,而不與變性后失去原本空間表位的捕獲一抗結合,因此既不識別抗體重鏈也不識別輕鏈,輕松避免了實驗干擾。


    ExactBlot?非輕重鏈特異性二抗ExactBlot?非輕重鏈特異性二抗

    圖左:使用常規Anti-IgG(H+L),檢測時變性后的抗體輕重鏈均被識別。

    圖右:使用正能- ExactBlot? IP專用二抗,有效避免輕重鏈干擾,目的蛋白信號更加清晰。

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    ExactBlot? Anti-Rabbit IgG for IP (HRP)

    Cat No. 550124

    Application: WB,ELISA

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